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PCR实验室

PCR实验室又叫基因扩增实验室。PCR是一种DNA快速扩增技术,具有高度敏感性、特异性、快速等特点。当某种病原微生物中病毒极少时,传统的检测方法难以检出,但通过采用荧光定量PCR方法,可将DNA片段扩增到百万倍以上,从而提高疾病诊断技术。

PCR实验室原则上分为四个单独的工作区域:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
PCR气流组织设计:
1、原始试剂混配室应为正压间,在微环境百级超净台内操作,须防止其它程序功能间对本操作间的污染;
2、DNA提取室应为微负压间,须设置排风系统,以防止核酸提取时可能产生的气溶胶对人员的侵害和对其它程序功能间的扩散污染;
3、PCR扩增室应为微负压间,须设置排风系统,以防止大量扩增产物对其它程序功能间的扩散污染;
4、检测室应为微负压间,须设置排风系统,以防止扩增产物在电泳测序过程中的扩散污染;同时因3130分析仪散热量较大,会提高室内温度3-5℃;
5、试剂混配室、DNA提取室、PCR扩增室、检测室如设置缓冲间,功能间内可均为正压,而在缓冲间内设置负压,气流从其双道门的门缝处分别向缓冲间内流动,用合理的气流组织方式避免各功能间的交叉污染。

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